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朗格尔汉斯岛的α细胞和β细胞的可视化

发布时间:2022-05-27    点击量:936

 何谓朗格尔汉斯岛(胰岛)

存在于胰脏的内分泌腺称为朗格尔汉斯岛(胰岛)。
胰腺包括向十二指肠分泌淀粉酶等消化酶的外分泌细胞和分泌激素的内分泌细胞,其中绝大部分为外分泌细胞。内分泌细胞作为小细胞团像岛那样散布在外分泌细胞中,根据发现者德国病理学家保尔·朗格尔汉斯的姓名,被命名为朗格尔汉斯岛。
由朗格尔汉斯岛分泌的胰岛素等激素具有调整血糖值的作用,若该功能下降将导致糖尿病。

 

朗格尔汉斯岛的细胞及其作用

胰脏分为胰头、胰体、胰尾,朗格尔汉斯岛多存在于胰尾。
朗格尔汉斯岛包括α(A)细胞、β(B)细胞、δ(D)细胞,分别分泌不同激素,调整血液中所含的葡萄糖浓度。由此,可保持血糖值的正常状态。

 

朗格尔汉斯岛的观察

通过抗胰高血糖素抗体与抗胰岛素抗体的荧光免疫染色,可将胰高血糖素阳性细胞作为α细胞,将胰岛素阳性细胞作为β细胞进行可视化,明确朗格尔汉斯岛内的各细胞分布。使用细胞计数应用程序,还可定量评价各阳性细胞的面积或荧光强度。近年来,作为治疗糖尿病的1种方法,对从iPS细胞等人类多功能干细胞制作胰脏细胞并进行移植的研究取得进展,且研究表明其中由糖尿病小鼠衍生而来的移植片所具有的胰岛素阳性细胞面积率较高,在此评价过程中也使用了荧光免疫染色的定量方法。

进行此类评价使用倍率约为4倍至20倍的物镜,由于无法将切片整体纳入视野,只能以存在朗格尔汉斯岛的部位为中心进行观察及拍摄。但近年来对评价数据客观性的要求越来越高,如何排除拍摄及分析时的随意性*已成为研究中的难题,单纯对特定部位进行单独观察及拍摄的方法已无法解决这一难题。
一体化荧光显微成像系统BZ-X800仅需指定切片外周的4点,即可通过自动拍摄图像并可高精度拼接图像的“图像拼接功能”,获得切片整体的高精细图像,此类难题也将迎刃而解。
在以下案例中,为使胰脏切片完整纳入1张图像内,使用Plan Apochromat4倍镜头,并通过图像拼接功能进行横向3张×纵向5张图像的自动拍摄及拼接。

* 排除随意性
随意是指在判断标准上没有逻辑必然性,仅凭借即兴判断,排除随意性就是排除这样的随意状态。论文重视的是“客观性”和“再现性”,使用显微镜拍摄的图像被认为对这2点有重大影响。在切片的局部图像中,会出现拍摄者随意拍摄对自己有利的部位的案例,但是拍摄没有接缝的高分辨率的整体像,可排除拍摄者的随意性,获得客观性高的评价。

 

 

使用物镜:Plan Apochromat 4X
图像拼接:5张 × 3张

 

如果引进一体化荧光显微成像系统BZ-X800

1、 针对无法*进入视野的大切片,一边移动载物台一边获取图像,将拍摄的图像拼接起来,即可合成1张高分辨率图像。

2、 即使标本有倾斜、高低差,也能在Z方向获取多张图像,只从拍摄的图像中合成焦点对准的部分,可构建焦点对准整个标本的全幅对焦图像。

3、 通过消除散射光影响导致的荧光模糊的“去霾处理功能”,可拍摄对比度高的清晰图像。

 

 

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